I2BC / Plateforme d’expression de protéines recombinantes en systèmes eucaryotes (Prot-Ex)

Plateforme technologique

Description

Devant la complexité toujours plus grande des objets protéiques à étudier et la quantité requise de protéines à purifier, la préparation d’échantillons constitue souvent une étape limitante à leur caractérisation structurale et fonctionnelle ultérieure. La plateforme Prot-EX offre une expertise diversifiée pour l’exploitation de différents systèmes de production d’origine eucaryote dédiée à la production de protéines recombinantes, en alternative aux systèmes bactériens :
- Petites protéines secrétées en levure Pichia pastoris
- Protéines solubles ou membranaires en levure Saccharomyces cerevisiae
- Complexes multiprotéiques eucaryotes en cellules d'insectes Sf21 ou H5
- Expression de protéines complexes en cellule de mammifères HEK Expi293-GnTI :
- Expression de protéines toxiques et/ou membranaires en système acellulaire à partir d’extrait de germes de blé.

La plateforme est rattachée au pôle des plateformes de Biologie Structurale de l'I2BC qui comprend les plateformes de Cristallographie, de RMN, de CryoEM, de Mesures d'Interactions Macromoléculaires et de sélection de binders spécifiques AlphaRep

Contacts

  • Mme Karine BLONDEAU

Laboratoire de rattachement

Plan et accès

I2BC-UMR CEA-CNRS-U. PARIS-SACLAY 9198, Bât 24, avenue de la terasse
91190 Gif sur Yvette

Equipements et technologies

Technologies utilisées

Préparation de vecteurs : Design, clonage, purification de plasmides
Préparation de suspension virales
Transformation ; Transfection
Culture cellulaire basse densité en shaker
Culture microbienne haute densité en bioréacteur
Cell-free : test d’expression et production en plus grand volumes Extraction de protéines (broyage cellulaire ; ultrafiltration) Analyse SDS-PAGE et contrôle qualité Purification de protéines

Mots clés

Equipements spécifiques

Nom Modèle Marque
4x 1L multi-bioréacteurs DASGIP® Parallel Bioreactor Eppendorf
Bioréacteurs 1.5, 5 & 15L EZ-control Applikon
Ultrafiltration tangentielle QuixStand benchtop syste Infors HT
Bioréacteurs 2x 1L MultiFor-S bioreactor Infors HT
Bioréacteurs 1x20L TechFor-S Infors HT
Broyeur de levures Pulverisette Planetary Mill, Fritsch
Cytomètre en flux FACS Guava easyCyte Cytek®
Incubateurs agités Minitron Multitron Ecotron Innova S44i Infors HT New Brunswick
Espace RNase free

Lien vers les équipements

Prestations & formations

Offres de formations

Écosystème

Etablissements de rattachement

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